醫(yī)藥行業(yè)是關(guān)系國(guó)計(jì)民生的重要產(chǎn)業(yè)，在保障人民群眾身體健康和生命安全、應(yīng)對(duì)重大公共衛(wèi)生事件和搶險(xiǎn)救災(zāi)、促進(jìn)經(jīng)濟(jì)發(fā)展和社會(huì)進(jìn)步等方面發(fā)揮了重要的作用。“十六大”以來(lái)，醫(yī)藥行業(yè)形成了化學(xué)原料藥、化學(xué)藥品制劑、中藥飲片、中成藥、生物與生化制品、衛(wèi)生材料及醫(yī)藥用品、醫(yī)療儀器設(shè)備及器械制造加工等門類比較齊全的產(chǎn)業(yè)體系，在對(duì)生產(chǎn)安全控制極其嚴(yán)格。醫(yī)藥廠房可能由于維護(hù)管理不當(dāng)或工作人員誤操作以及凈化空調(diào)系統(tǒng)長(zhǎng)期使用運(yùn)轉(zhuǎn)使空氣過(guò)濾器性能變化等各類因素, 會(huì)影響潔廠房的性能參數(shù)。為了保障生產(chǎn)安全，所以投入使用后的潔凈廠房空氣浮游菌的日常監(jiān)測(cè)是十分必要的重要工作。

我們使用環(huán)凱牌浮游微生物采樣器（HKM-II）對(duì)潔凈廠房進(jìn)行采樣，HKM--II 型浮游微生物采樣器是一種高效的多孔吸入式浮游微生物采樣器。它根據(jù)等速采樣理論設(shè)計(jì)，采樣準(zhǔn)確。采集頭口風(fēng)速與潔凈室內(nèi)風(fēng)速基本一致，能更準(zhǔn)確地反映潔凈室內(nèi)的微生物濃度。采集樣本時(shí)，空氣攜帶顆粒以一定的速達(dá)撞擊在培養(yǎng)基表面，這一過(guò)程相當(dāng)于安德森原理的 5 級(jí)，保證大于 1 微米的顆粒全部被收集。顆粒均勻撞擊在培養(yǎng)皿內(nèi)的培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)基為細(xì)菌創(chuàng)造了保持活性的最佳環(huán)境，保證了測(cè)定結(jié)果精確可靠。采樣準(zhǔn)備工作如下：

1）被測(cè)試潔凈室溫、濕度須達(dá)到規(guī)定的要求; 靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。

2）對(duì)單向流測(cè)試應(yīng)在凈化空調(diào)系統(tǒng)正常運(yùn)行不少于 10 min;非單向流不少于 30 min 后開(kāi)始。

3）靜態(tài)測(cè)試時(shí), 室內(nèi)人員不多于 2 人。采樣時(shí)測(cè)試人員應(yīng)在采樣口下風(fēng)側(cè)。

4）測(cè)試人員應(yīng)按無(wú)菌操作規(guī)程進(jìn)行。采取一切措施防止采樣口的污染和其它人為對(duì)樣本的污染。

5）測(cè)試人員必須穿戴符合潔凈級(jí)別的潔凈服。

6）浮游菌測(cè)試前, 被測(cè)手術(shù)室(潔凈室)已經(jīng)過(guò)消毒。

以上準(zhǔn)備好時(shí)，我們使用HKM-II采樣器采樣步驟：

1、 在有平臺(tái)的潔凈室內(nèi)編制培養(yǎng)皿 (XX 潔凈室, XX 測(cè)點(diǎn)), 操作前應(yīng)用浸濕 75%乙醇的醫(yī)用脫脂棉花擦拭平臺(tái)。測(cè)試人員雙手用同樣方法嚴(yán)格消毒。在編制過(guò)程中再次仔細(xì)檢查培養(yǎng)基平皿的質(zhì)量, 有變質(zhì)、破損或污染不能使用。

2、用浸濕 75%乙醇的醫(yī)用脫脂棉花擦拭采樣器的采樣口, 采樣管、采樣器的項(xiàng)蓋, 轉(zhuǎn)盤及罩子內(nèi)外表面。

3、 采樣器經(jīng)消毒后不放入培養(yǎng)皿, 啟動(dòng)儀器空轉(zhuǎn)運(yùn)行不少于 5 min, 使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)。

4、 根據(jù)廠房的潔凈度級(jí)別設(shè)定采樣量，采樣器的流量(L/min)X 采樣時(shí)間(min)=采樣量(L), 每次最小的采樣量見(jiàn)表 。

5 、放入培養(yǎng)皿,蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。采樣操作時(shí), 培養(yǎng)皿應(yīng)輕拿輕放, 用“五指抓拿”培養(yǎng)皿外徑, 盡量避免人為對(duì)樣本造成污染。

7、采樣點(diǎn)的布置及采樣點(diǎn)數(shù)量

注意事項(xiàng)：測(cè)點(diǎn)的位置離地面 0.8 m~1.5 m 左右；送風(fēng)口測(cè)點(diǎn)位置離開(kāi)送風(fēng)口面 0.3 m 左右，最少采樣點(diǎn)數(shù)目見(jiàn)表。

正式啟動(dòng)HKM-II采樣器（見(jiàn)下圖）

按“菜單鍵”進(jìn)入?yún)?shù)設(shè)定狀態(tài)：

a、 采樣量設(shè)定：按“選擇鍵”調(diào)整光標(biāo)位置，按“上、下鍵”調(diào)整至所需采樣量，按“退出鍵”退出設(shè)定，按“菜單鍵”進(jìn)入下一參數(shù)設(shè)定。

b、 采樣延遲時(shí)間設(shè)定：按“上、下鍵”調(diào)整至所需采樣延遲時(shí)間，按“退出鍵”退出設(shè)定，按“菜單鍵”進(jìn)入下一參數(shù)設(shè)定。

c、 采樣地點(diǎn)設(shè)定：按“上、下鍵”設(shè)定采樣地點(diǎn)編碼，按“退出”鍵退出設(shè)定，按“菜單鍵”進(jìn)入下一參數(shù)設(shè)定。

d、保存采樣設(shè)定： 按“上、下鍵”選擇“是”保存當(dāng)前的采樣參數(shù)，并按“選擇鍵”生效。按“退出鍵”返回主菜單，設(shè)定完成。

e、再按“采樣鍵” ，浮游微生物采樣器即進(jìn)入采樣工作狀態(tài)；此時(shí)采樣延遲倒計(jì)時(shí)將會(huì)啟動(dòng)，采樣延遲倒計(jì)時(shí)結(jié)束后采樣泵自動(dòng)開(kāi)始運(yùn)行，在到達(dá)設(shè)定的采樣量后，采樣泵將自動(dòng)停止，屏幕返回主界面，本次采樣結(jié)束，相關(guān)采樣數(shù)據(jù)自動(dòng)貯存。

8、 培養(yǎng)

8.1、把采樣好的培養(yǎng)皿收集倒置在已消毒過(guò)的平臺(tái)上。

8.2、用已高壓滅菌過(guò)的牛皮紙、包布包裝好裝入消毒盒送培養(yǎng)。

8.3、 雙手再經(jīng)消毒后, 小心取出已采樣過(guò)的培養(yǎng)皿樣本, 倒置于 35℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng) 48 h。

9 、菌落計(jì)算

9.1、用肉眼直接讀數(shù), 然后用 5~10 倍放大鏡檢查是否有遣漏。若平皿上有 2 個(gè)或 2 個(gè)以上菌落重疊、分辨時(shí)仍以 2 個(gè)或 2 個(gè)以上讀數(shù)。或用環(huán)凱牌全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀smartcounter計(jì)數(shù)，方便直接得出結(jié)果。

9.2、填寫生物微粒檢測(cè)記錄、記錄表見(jiàn)。

10、 結(jié)果計(jì)算：每個(gè)測(cè)點(diǎn)的浮游菌濃度計(jì)算

平均濃度(個(gè)/m)=菌落數(shù)/采樣量

11、結(jié)果評(píng)定

用浮游菌平均濃度判斷潔凈室(區(qū))空氣中的微生物。(見(jiàn)以下潔凈手術(shù)室的等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)) 

注意：

1）每個(gè)測(cè)點(diǎn)的浮游菌平均濃度必須低于所選的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于細(xì)菌濃度的界限。

2 )若某測(cè)點(diǎn)的浮游菌平均濃度超過(guò)評(píng)定標(biāo)準(zhǔn), 則必須對(duì)此區(qū)域先行消毒, 然后重新采樣兩次。再次測(cè)試結(jié)果必須合格。